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显微镜分辨率计算时的波长问题

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  • TA的每日心情
    奋斗
    2024-10-18 08:34
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    [LV.9]以坛为家II

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    小白

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    发表于 2022-6-3 21:56 | 显示全部楼层 |阅读模式
    想请教下各位大佬,在显微镜分辨率计算公式:0.61λ/NA中,λ波长我们通常选择0.55μm。倘若使用白光LED进行落射照明,此时按照λ=0.55μm计算就与实际对不上了。白光LED光谱有两个峰值,主峰值在0.45μm或0.465μm,另一个峰值在0.53μm左右。计算分辨率的这个波长是该选择主峰值波长,还是要计算一个平均波长,多峰值光谱平均波长该如何计算呢?
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  • TA的每日心情
    开心
    2023-8-7 00:25
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    [LV.7]常住居民III

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    发表于 2022-6-4 06:37 | 显示全部楼层
    用Zemax设计时可见光常用Fdc三条谱线代替,波长0.5876μm是主波长,Fc光用来计算色差。书本上用波长0.55μm主要是考虑用眼镜看显微镜的成像,然后推导出最小分辨率。
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  • TA的每日心情
    奋斗
    2023-11-23 21:30
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    [LV.5]常住居民I

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    小白

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    发表于 2022-6-4 10:03 | 显示全部楼层
    你这个如果是用于荧光显微镜的话,分辨率计算应该要看激发荧光的波长吧。如果是label free的显微镜,我个人感觉可以按波长的响应率,算个加权平均分辨率。
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  • TA的每日心情
    奋斗
    2024-10-18 08:34
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    小白

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     楼主| 发表于 2022-6-5 21:02 | 显示全部楼层
    zenghui 发表于 2022-6-4 10:03
    你这个如果是用于荧光显微镜的话,分辨率计算应该要看激发荧光的波长吧。如果是label free的显微镜,我个人 ...

    我的是用在金相显微镜中,是使用工业相机进行探测,若这样是否就需要将LED峰值在COMS的响应率进行加权平均来计算其波长
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  • TA的每日心情
    奋斗
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    发表于 2022-6-6 21:46 | 显示全部楼层
    sunsakery 发表于 2022-6-5 21:02
    我的是用在金相显微镜中,是使用工业相机进行探测,若这样是否就需要将LED峰值在COMS的响应率进行加权平 ...

    金相显微镜拍的是材料的反射图像是吧。要精确计算分辨率是不是 还得知道这个材料光谱反射率,因为最后为图像做贡献的光谱分布=LED发射光谱*反射率谱*CMOS响应谱。假设反射率都为1,光源发射谱线中,峰值波长含量远高于其它波长,就可以用你说的方法进行近似计算。说实话这个感觉也算不太准,不如就拿峰值波长算算,只要实际分辨率与之差距不大,我觉得就OK。我是做荧光显微镜的,以上纯属自己推测。
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